每50~100mg 组织加入0.2体积 trizol
1.加钢球1颗,设置研磨仪参数:12单位振频,1min,每种样品基本充分匀浆
2. 将上述匀浆液每0.2体积 trizol 试剂用量的匀浆液中加入0.04体积氯方,盖紧管盖,手动剧烈震摇15 秒钟,然后室温静置2~3 分钟。
3. 4℃ 10,000g 离心10 分钟。
4. 小心吸取上层水相(无色)加入到新试管中,同时计算所吸取的水相体积。不必过多吸取,防止吸入dna和蛋白杂质(中间层,白色)。
5. 加入所吸取水相等体积预冷的---淳,盖紧管盖,轻轻摇匀。
6. 室温静置10 分钟,待rna 充分沉淀(为减少rna 降解,此步骤可省略)。
7. 4℃ 10,000g 离心10 分钟。
8. 将上清弃除(注意别丢弃沉淀),每管加入0.2体积75%---润洗,盖紧管盖,轻轻晃动试管,以去除残留的---淳和盐份。4℃ 7,500g 离心5 分钟。
9. 将上清弃除(注意别丢弃沉淀),叶绿素a研磨仪报价,打开管盖,将rna 沉淀干燥(室温挥发或真空干燥)。注意rna 沉淀不可完全干燥,否则难以溶解。
10. 将rna 沉淀溶解于适量的无rnase 水中。如果rna 沉淀溶解不完全,将使od260/od280≤1.6。此rna 溶液可用于进一步实验,或者-70℃保存。
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1. 适用于各种植物组织包括根、茎、叶、花、果、种子等样品的研磨破碎;
2. 适用于各种动物组织包括大脑、---、肺、胃、胸腺、肠、肌肉、骨骼等样品的研磨破碎;
3. 适用于---、---等样品的研磨破碎;
4. 适用于食品、---成分分析检测的研磨破碎;
5. 适用于易挥发样品包括煤炭、油页岩、蜡制品等样品的研磨破碎;
6. 适用于塑料、聚合物包括pe、ps、纺织品、树脂等样品的研磨破碎。
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1. 将处理好的样本、研磨球依次加入离心管中;
2. 将装好样品的离心管放入适配器中;
3. 将带有样品的适配器放入液氮中冷冻数分钟;
4. 将冷冻后的样品和适配器放在夹具中间,调整好位置;
5. 将夹具放在样品台上,定位槽定位,旋紧垂直定位旋钮,安全锁归位;
6. 盖上机器的安全门;
7. 设置振动频率、振动时间;
8. 启动机器,执行破碎过程;
9. 等待机器完全停止振动后关机,打开安全门,取出样品;
10. 仪器归位。
注意事项:
2. 样品对称分布于样品夹中,---样品夹平衡;
3. 关闭安全门前需确认夹具已完全固定,无松动现象;
4. 设置振荡频率时不得超过**量程1800次/min;
5. 对样品进行冷冻时,应注意防止液氮溅出,造成伤害。
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